Die Uffizien, die im 16. Jahrhundert von Vasari für den Großherzog erbaut wurden, sind eines der ältesten und größten Museen der Welt. Sie können mit Gemälden des exquisiten Botticelli, Leonardo, dem Schöpfer des Sfumato, Michelangelo, dem Schöpfer der „Terza maniera“, und Raffael, der tragisch jung starb, prahlen. Hier hängen Werke von Caravaggio und Tizian und es gibt eine bedeutende Sammlung flämischer, niederländischer und französischer Gemälde. Die Galerie zeigt Gemälde aus dem 12. Jahrhundert in Florenz und Siena, der Früh- und Hochrenaissance, dem Manierismus und dem Barock. Sie beherbergt auch eine bedeutende Sammlung antiker Skulpturen. Das Gebäude und die Piazza selbst sind als wunderbare Beispiele des Manierismus von größter Bedeutung. Die Uffizien werden immer noch erweitert und immer mehr Werke verlassen die Depots und finden hier ein dauerhaftes Zuhause.